Преимплантационное генетическое тестирование (ПГТ) - это анализ генетических заболеваний у эмбриона до момента его переноса в полость матки. Анализ проводится из клеток трофэктодермы эмбриона на стадии бластоцисты. Целью ПГТ является отбор эмбрионов, не имеющих хромосомных и генных нарушений для рождения здорового ребенка. ПГТ является дополнительной методикой к вспомогательным репродуктивным технологиям.
Преимплантационное генетическое тестирование анеуплоидий (ПГТ-А).
ПГТ-А это тестирование, направленное на определение количественных хромосомных изменений (анеуплоидий) эмбриона.
ПГТ-А назначают при неудачах ЭКО и привычном невынашивании беременности. Как при естественном зачатии, так и в программах ВРТ, основное количество прерываний беременности (75-80%) приходится на I триместр. ПГТ-А способствует снижению частоты неблагоприятных исходов беременности. ПГТ-А показано женщинам старше 35 лет, а также пациентам с самопроизвольными абортами в анамнезе. Это объясняется тем, что с возрастом вероятность зачатия хромосомно-нормального потомства уменьшается: у женщин до 30 лет вероятность рождения больного ребенка 1:385, с 31 до 40 лет - 1:63, старше 40 лет - 1:19.
Накопленные мировые данные позволили установить наличие хромосомных нарушений у 54% эмбрионов в группе пациенток до 35 лет, 74% - от 35 до 39 лет, 86% - старше 40 лет, 95% - старше 43 лет. Это является основной причиной низкой частоты наступления беременности и невынашивания у женщин старше 40 лет даже в программе ВРТ.
ПГТ также важно в случаях тяжелого мужского бесплодия. Изучение хромосом в сперматозоидах, полученных от мужчин с олигоастенотератозооспермией, показало 4-х кратное повышение уровня анеуплоидии по сравнению с мужчинами без отклонений в показателях спермограммы. Оплодотворение яйцеклетки сперматозоидами с аномальным набором хромосом приводит к формированию эмбриона с генетической патологией, что в дальнейшем приводит к невынашиванию беременности или рождению больного ребенка.
Полнохромосомное тестирование эмбрионов при ПГТ-А проводится на основе методов NGS и a-CGH.
Преимплантационное генетическое тестирование структурных хромосомных перестроек (ПГТ-СП)
ЭКО с ПГТ-СП является методом профилактики наследственной патологии для носителей структурных хромосомных перестроек (транслокаций, инверсии и инсерции).
У человека возможны два основных типа патологической перестройки (транслокации) между хромосомами: реципрокные (сбалансированные) и робертсоновские. Подавляющее большинство носителей транслокаций фенотипически нормальны, но имеют высокую вероятность спонтанных прерываний беременности или бесплодия, повышенный риск рождения детей с умственной отсталостью и множественными врожденными пороками развития. Риск рождения больного ребенка у носителей транслокации может варьировать от низкого (5% и менее) до высокого (20-50%) в зависимости от определенных характеристик.
Для носителей робертсоновских транслокаций при ПГТ-СП используется анализ эмбрионов методов секвенирования нового поколения – NGS.
Преимплантационное генетическое тестирование моногенных заболеваний (ПГТ-М)
ПГТ-М направлено на диагностику моногенных заболеваний и рекомендовано для семей с установленной генной болезнью. В мире 2-3% детей рождаются с моногенными заболеваниями, примерно четверть проявляется сразу, остальные позже. Если в семье есть ребёнок или прямой родственник с генной болезнью, то риск рождения ребёнка с таким же заболеванием может быть высок.
Причиной генной болезни является нарушение (мутация) определенного гена (участка ДНК). Для того чтобы супружеская пара могла планировать ПГТ обоих супругов необходимо обследовать в отношении генного дефекта, поскольку мутация (мутации) должна быть выявлена. При неясном характере наследования, неустановленной мутации, или мутациях, не имеющих клинического значения планирование ПГТ-М невозможно.
ПГТ-М позволяет отобрать эмбрионы с нормальным генотипом и может проводиться для генных заболеваний с разным типом наследования: аутосомно-рецессивным, аутосомно-доминантным, сцепленным с полом. Показанием к ПГТ-М является высокий генетический риск в отношении тяжелого наследственного заболевания с выявленным молекулярно-генетическим дефектом. Особенностью ПГТ-М является то, что эта технология применима для супружеской пары, даже при отсутствии факта бесплодия. ЭКО в данном случае определяет возможность получения и обследования эмбрионов до переноса в полость матки.
Подготовительный этап является обязательной частью ПГТ-М в лечебном цикле ЭКО. Для этого этапа потребуется кровь или буккальный эпителий женщины, супруга, родственников первой степени родства — родителей и/или детей.
В ходе подготовительного этапа из всех образцов выделяется ДНК, в течение 2-3-х месяцев разрабатывается схема тестирования генного нарушения для конкретной семьи. Схема включает анализ мутаций и косвенных маркеров. Именно для того, чтобы выявить информативные маркеры, необходимы биологические образцы родственников.
Основным методом генетического исследования при проведении ПГТ–М является полимеразная цепная реакция (ПЦР).
Проведение ПГТ-М можно сочетать с диагностикой хромосомных нарушений у эмбрионов (ПГТ-А), так как для всех эмбрионов человека характерен достаточно высокий неспецифический риск других генетических нарушений — числовых хромосомных аберрации.
ПГТ в лечебном цикле ЭКО-ИКСИ
К началу лечебного цикла ЭКО-ИКСИ-ПГТ пациентка должна иметь полное обследование, необходимое для стандартной программы ВРТ, а также отсутствие противопоказаний.
Лечебный цикл с ПГТ проводится аналогично стандартному протоколу ЭКО и включает этапы:
- стимуляция суперовуляции;
- забор яйцеклеток путем трансвагинальной пункции;
- оплодотворение яйцеклеток и культивирование эмбрионов;
- биопсия клеток трофэктодермы для ПГТ, криоконсервация эмбрионов;
- получение результата ПГТ, разморозка и перенос нормального (при его наличии) эмбриона в полость матки.
Проведение данного анализа повышает вероятность рождения здорового ребенка до 72%.
